提取亲子鉴定中DNA的程序和步骤全过程
2016-12-02 10:37 机构:DNA亲子鉴定中心

  一根头发,一片指甲,一滴血液就可以鉴定出孩子是否是自己亲生的,为什么亲子鉴定会有那么神奇的功效了,相信这是很多人好奇的一件事,其实亲子鉴定采集的样本很简单,但是鉴定的过程是比较复杂的。提取DNA的每一步都需要人工操作,一共有21步,需要两三个小时的时间,先后需要加入五种试剂。由于DNA是藏在白细胞的细胞核里,所以要先除去红细胞,然后让白细胞的细胞核裂解开,把藏在里边的DNA释放出来。“做这一步的时候把样本放在震荡仪上,震荡仪边晃动边加热,加快DNA释放。”DNA被释放出来之后,还要除去样本中的蛋白,这又需要把样本放到0℃~5℃的冰箱中冷藏。如果不同的位点在三个以内,不能排除基因突变造成的不同,这种情况下还需要加做位点再次对比。一般,整个亲子鉴定过程需要5到10个工作日。

 
 
  二、DNA亲子鉴定的步骤
 
  DNA亲子鉴定的步骤全过程大致如下:DNA提取--DNA纯化--PCR扩增--分离和检测PCR产物--判断样本基因型--样本基因型与其他样本结果对照--如果匹配再在基因数据库中进行查找、对比--获得样本带有随机匹配可能性的报告。
 
  1、DNA提取
 
  就是把样本细胞核中所含有的DNA提取出来,然后进行一定的纯化,去除样本中的杂质。
 
  2、PCR扩增
 
  PCR的中文名为聚合酶链式反应,简单的说,PCR扩增这一步就是把我们所需要的片段通过酶促反应,放大到通过某些专用仪器可以看到的程度。
 
  3、后PCR反应
 
  这一步主要是上测序仪检测的准备阶段,将双链的DNA打开,加一些检测用的的内标,主要是用来标记检测的片段长度。
 
  4、毛细管测序仪检测
 
  由于DNA带有电荷,通过毛细管电泳的方法,不同片段DNA长度的电泳速度不同,在同样的电压,同样的电泳时间下,泳动的距离不同,这些长短不同的距离可以通过前期加入的内标测量分辨出来,同时可通过一定的软件显示在电脑上,方便检测人员处理和分析数据。
 
  5、分析数据,出具报告
 
  主要是检测人员将所得结果进行分析汇总、计算,然后出鉴定结论和报告。

    DNA是从收集的材料中比如几滴血,腮细胞或培养的组织内提取而来。用畴素将DNA样本切成小段,放进喱胶内,用电泳槽推动DNA小块使之分离--最细的在最远,最大的最近。之后,分离开的基因放在尼龙薄膜上,使用特别的DNA探针去寻找基因,相同的基因会凝聚于一起,然后,利用特别的染料,在X光的环境下,便显示由DNA探针凝聚于一起的黑色条码。小孩这种肉眼可见的条码很特别一半与母亲的吻合,一半与父亲的吻合。这过程重覆几次,每一种探针用于寻找DNA的不同部位并形成独特的条码,用几组不同的探针,可得到超过99.9%的父系分辨率。

 

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