可以通过杂交的方法测定样本DNA含量吗?
2016-08-24 08:49 机构:DNA亲子鉴定中心

  可以通过杂交的方法测定样本DNA含量吗?服务皆源于需求,而科技的发展总是能带给人意想不到的惊叹,让需求变为现实。如DNA鉴定技术的出现,则为人们提供了很多方便,更是引领者人们对每一个谜团的探知。而通过杂交技术检测DNA则是属于对DNA残留定量的主要方法之一。

  分子杂交技术检测残余DNA的原理和方法:

  分子杂交分析的基本原理是基于DNA探针检测变性而且固定在硝酸纤维素膜上的宿主细胞DNA。这些探针可以不依赖宿主细胞DNA来制备,例如用随机引物制备探针。探针上标记酶﹑生物素﹑放射性同位素﹑地高辛(Dig)等。由于地高辛标记核酸探针,操作方便、灵敏度高,已标记的探针在4℃贮存可达两年之久,方便随时应用,所以现在常采用地高辛标记核酸探针,用光标记法将光敏Dig标记到探针上,制成光敏-Dig-核酸探针,再与固定在硝酸膜上的靶核酸进行靶DNA分子杂交,使之与抗Dig-碱性磷酸酶结合,最后可用不同的检测方式进行检测,发光检测和显色检测均可,灵敏度可达10pg以下(表 1 三种残余DNA检测方法的比较)。

  通过分子杂交检测残余的DNA相对对样品DNA的损失小,是一种比较可行经济的实用方法,也是目前国内的主用方法。

  DNA分子杂交技术用途:

  DNA分子杂交技术用途在分子生物学领域中已广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面.因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多.利用DNA探针还可以用于环境监测,如检测饮用水中病毒的含量。此法更快速、灵敏。

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